【笔谤辞迟别颈苍迟别肠丑】"高特異性" & "低批次間變異" 的 『重组抗体』
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"高特異性" & "低批次間變異" 的
抗体在生物研究中已经是几十年来的关键试剂。最近,由於科学可重复性问题,对具有极高特异性和最小批次变异的抗体需求不断增长。在此之前,这是不可能实现的。然而,分子生物学和筛选技术的最新进展使得生产基因定义的重组抗体成為可能。
由於其 "高特異性" 和 "低批次間變異",被誉為未来研究中的理想抗体,為研究人员提供了无与伦比的可重复性和对这些试剂的信任。
什麼是?
生產重组抗体的方法有很多種。在 Proteintech,重组抗体是透過體外克隆來自免疫動物 B 細胞或漿細胞的抗體重鏈和輕鏈 DNA 序列而產生的單株抗體。
与传统从杂交瘤产生的单株抗体不同,重组载体被引入表达宿主(例如大肠桿菌)中,以产生抗体。这种重组技术几乎没有批次间差异,消除了可能导致单株抗体变异的遗传漂变风险。
為什麼选择?
批次間高度一致性 (High lot-to-lot consistency)
抗體序列 DNA 文庫的儲存以及隨後重組技術的使用,確保了抗體生產的高度一致性和可靠性,最大限度地降低了遺傳漂變的風險,並可提供長期穩定的優質抗體供應。
持續供應 (Continuous supply)
由於重组抗体生產的性質,重组抗体的生產時間得以減少,重组抗体的大規模生產也更容易實現。因此,由於批次之間幾乎沒有差異且易於擴展,重组抗体非常適合需要大量抗體的長期項目或實驗。同時單株和多株抗體的生產有時會面臨產量低的問題,因此使用重組生產使製造商能夠規避這個問題。
更提升的靈敏度及更高的親和力 (Increased sensitivity and higher affinity)
一旦克隆了用於重組生產的抗體序列,就可以修改該序列以產生能夠以更高親和力和特異性與其標靶結合的抗體。抗體工程還可以創建抗體“嵌合體(chimeras)”,從而可以將抗體的 Fc 部分更改為不同物種的 Fc 部分。
目標選擇困難 (Difficult target selection)
有一些目标,例如特定的蛋白质亚型或磷酸化蛋白质,可能很难使用小鼠杂交瘤(丑测产谤颈诲辞尘补)技术产生高品质且可靠的抗体。由於重组技术使抗体工程能够从比小鼠具有更丰富免疫多样性的物种(如兔子和骆驼)中获得抗体,可以针对这些难以攻克的目标产生特异性抗体。
無動物生產 (Animal-free production)
全球對無動物技術的需求日益增加,並且也受到鼓勵。在重組生產中,一旦抗體序列在免疫後被克隆,就不再需要使用動物。這個過程甚至可以從非傳統來源創造抗體。例如,Proteintech的SARS-COV-2 S蛋白重组抗体就是從康復患者血清的小樣本中提取的。
Proteintech 的重组抗体生產
在 Proteintech,我們生產兔子的重组抗体。與其他方法相比,兔子在重组抗体生產方面具有卓越的品質,利用其天然免疫反應,經過進化優化的表位識別、高抗體多樣性以及單一同種型亞類。
Proteintech 的重组抗体開發始於兔子免疫。當免疫反應達到高峰時,使用我們的專有技術從兔子分離出抗原特異性單 B 細胞。然後對選定的 B 細胞進行篩選,以確定其產生具有最高靈敏度和特異性的抗體的能力。然後將來自所選 B 細胞的抗體重鏈和輕鏈基因克隆到細胞系中以表達所需的抗體。這些抗體經過廣泛驗證,遵循 IWGAV(國際抗體驗證工作小組)的建議,以證明特異性、敏感性和再現性。
ChromoTek 重組 VHH 融合抗體 (ChromoTek Recombinant VHH Fusion Antibodies)
奈米抗体(狈补苍辞产辞诲颈别蝉)是来自骆驼科动物重链抗体的结合域,也可以与贵肠域融合以产生嵌合重链抗体。
这种贵肠域融合形式结合了奈米抗体与传统抗体的优点:
VHH/Fc Fusions (i) 是二價的,因此比原始奈米抗體具有更高的親和力和結合力,
VHH/Fc Fusions (ii) 能夠識別傳統抗體無法識別的獨特三維構象表位,
VHH/Fc Fusions (iii) 可以使用各種抗體試劑(如二抗和Nano-Secondaries)進行檢測和捕獲。
與其他重组抗体一樣,VHH/Fc-Fusions (VHH/Fc融合抗體)具有高度的批次一致性和無限供應的優勢。這些 Nanobody Fc-fusion recombinant antibodies (奈米抗體Fc融合重组抗体) 是與Absolute Antibody Ltd.合作開發的。
Proteintech和ChromoTek提供融合了兩種不同Fc域的奈米抗體 - rabbit IgG 和 mouse IgG1,以便在實驗中提供靈活性。
目前受歡迎的 ChromoTek Nanobodies,如 anti-GFP、anti-mNeonGreen、anti-TurboGFP 和 anti-vimentin-VHHs,均有嵌合 rabbit IgG 和 mouse IgG1 形式可供選擇。
产物亮点:
- 被引用超過2000篇論文的熱門奈米抗體融合了 rabbit IgG 或 mouse IgG1 之 Fc Fc-domains
- 识别传统抗体无法识别的独特表位
- 二价结构使其比原始奈米抗体具有更高的亲和力和更好的信号放大效果
- 无限供应,批次间高度一致
- 重组表达
- 與 Nano-Secondaries 兼容
Product | Application | Fc domain | Cat no. | ||
GFPVHH-Fc fusion | |||||
IF | mouse IgG1 Fc | ||||
IF | rabbit IgG1 Fc | ||||
mNeonGreen VHH-Fc fusion | |||||
IF | mouse IgG1 Fc | ||||
IF | rabbit IgG1 Fc | ||||
TurboGFP VHH-Fc fusion | |||||
IF | mouse IgG1 Fc | ||||
IF | rabbit IgG1 Fc | ||||
Vimentin VHH-Fc fusion | |||||
IF | mouse IgG1 Fc | ||||
IF | rabbit IgG1 Fc |
资料来源:笔谤辞迟别颈苍迟别肠丑
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