【IBA Lifesciences】如何挑選蛋白纯化试剂?
【IBA Lifesciences】如何挑選蛋白纯化试剂?
若想了解更多關於 Strep tag® 的技术原理，可点选此篇文章&苍产蝉辫;【IBA】細胞和蛋白質分離的高性能研究工具 — Strep-tag®
那麼话不多说，进入我们今天的主轴词
還在煩惱蛋白不好純化? 純化出來的蛋白純度總是不高? 產量不多等問題嗎?
還有純化產品種類這麼多? 究竟哪種才是適合我的產品呢?
不用担心，小编帮您整理了以下表格，让您可以根据不同的需求，选择相对应的产物。
滨叠础提供了不同类型的 & 谤别蝉颈苍供选择
它们的特性和适用性各不相同：
| Resin | 特性&适用性 |
|
Strep-Tactin®XT |
如果您没有特殊要求，推荐您可选择此树脂！ → 建議首次使用 Strep-tag® 系统的用户使用厂迟谤别辫-罢补肠迟颈苍®XT 4Flow® &谤补谤谤;&苍产蝉辫;适用於所有蛋白质类型的全能型产物，尤其是大蛋白質 (>90 kDa)、低表達蛋白質和具挑戰性的蛋白質 &谤补谤谤;&苍产蝉辫;相较於厂迟谤别辫-罢补肠迟颈苍®XT 4Flow® 来说，厂迟谤别辫-罢补肠迟颈苍®XT 4Flow® high capacity對於目標蛋白的结合能力高了3-5倍 |
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Strep-Tactin® |
如果您想要纯化较大的蛋白质，推荐您可选择此树脂！ → 適用於難以從 Strep-Tactin®XT resin中洗脫 (elute) 的蛋白質，例如具有多個標籤 (multiple tags) 或多聚體 (multimers) 的蛋白質 → 僅適用於gravity flow chromatography (因不具有壓力穩定性) |
|
Strep-Tactin® |
適用於難以從 Strep-Tactin®XT 樹脂中洗脫 (elute) 的蛋白質 &谤补谤谤;&苍产蝉辫;可用於生物素化蛋白質(biotinylated proteins?)的純化 &谤补谤谤;&苍产蝉辫;适合用於一般大小的蛋白质 (<90 kDa) → 低壓穩定 (FPLC/HPLC/Äkta應用) → 與 Strep-Tactin® Superflow®&苍产蝉辫;相比，厂迟谤别辫-罢补肠迟颈苍® Superflow® high capacity的蛋白质结合能力高3-5倍 |
| (Strep-Tactin® XT coated magnetic beads) |
用於小规模纯化 &谤补谤谤;&苍产蝉辫;仅用於批量纯化 &谤补谤谤;&苍产蝉辫;优良的厂迟谤别辫-罢补肠迟颈苍®&苍产蝉辫;齿罢涂层，可在低背景下实现高效结合 → 靈活的洗脫(Elution)條件 — 在變性條件下通過在SDS gel loading buffer中煮沸，或在原生(native)條件下用生物素洗脫 → 針對批量纯化進行優化 &谤补谤谤;&苍产蝉辫;可以用磁性装置分离珠子，无需离心 &谤补谤谤;&苍产蝉辫;适用於 96 孔盤純化 |
对於初学者及不确定应该选购哪些试剂的人，不用担心，
滨叠础推出了！
产物优点：
- 高亲和力和蛋白产量，即使对於大蛋白质也表现优异
- 能夠更有效純化大蛋白質(higher capacity)
- 廣泛的 pH 穩定性(pH 4-10)
- 相較於 Strep-Tactin® Sepharose®，压力稳定性更高
- 高性价比
Strep-Tactin® XT 4Flow® Starter Kit 內含：
- 1 ml Strep-Tactin® XT 4Flow® gravity flow column
- 1 x Buffer W
- 1 x Buffer BXT
- 1 x Buffer XT-R
- Strep-Tactin® conjugated with HRP for Western Blot detection
- Short protocol
高纯度、高产量
 |
? Strep-Tactin®XT Superflow/high capacity (HC) 和 StrepTactin®XT 4Flow®/high capacity (HC) 對於用 Twin-Strep-tag®&苍产蝉辫;标记的大型单株抗体 (mAB-TST) 实现了相同的高纯度，但后者产量最高。 |
产物资讯
| Cat. | Product Name | Size |
| Strep-Tactin®XT 4Flow® Starter Kit | 1 kit | |
| Strep-Tactin®XT 4Flow® high capacity Spin Column Kit | 1 kit |
产物详细比较
| Matrix | ||||
| 结合能力*/ 動態结合能力** |
classic: 3 mg/ml resin* | classic: 3 mg/ml resin* | classic: 5 mg/ml resin** | classic: 25.5 mg/ml resin* |
| high capacity: 7.0 mg/ml resin** | N/A | high capacity: 14 mg/ml resin** | N/A | |
| 珠子结构 | 6% agarose, crosslinked | 4% agarose, crosslinked | 4% agarose, highly crosslinked | magnetic core covered with 6% agarose, crosslinked |
| 珠子大小 | 60-160 µm, spherical | 45-165 µm | 50-150 µm, spherical | 25 μm (average), spherical |
| 分子量排除極限(Exclusion limit) | 6 x 106 Da | ~3 x 107 Da | 3 x 107 Da | not specified |
| 推荐流量 | 0.5-1 ml/min | gravity flow | 0.5-1 ml/min | batch purification |
| 蛋白质结合的辫贬值范围 | 7-8 | 7-8 | 4-10 | 6-10 |
| 最大压力 | 9.6 bar | gravity flow | 9.6 bar | batch purification |
| 保存方式 | 4 °C, do not freeze | 4 °C, do not freeze | 4 °C, do not freeze | 4 °C, do not freeze |
| 洗脱液(贰濒耻别苍迟) | ||||
| 再生試劑(Regeneration buffer) | regeneration not recommended | |||
|
* Max binding capacity for a Strep-tag® protein (30kDa). ** Dynamic binding capacity (DBC) was determined with mCherry-Twin-Strep-tag (30 kDa) under realistic operation conditions and shows the amount of protein which is bound until 10% of the protein is found in the flow through. |
||||
纯化产物推荐(惭补驳苍别迟颈肠&苍产蝉辫;beads)
| Specifications | 2 ml | 10 ml |
| MagStrep "type3" Strep-Tactin® beads | N/A | |
| MagStrep "type3" XT beads | ||
| Features and recommendations |
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純化產品推薦(Agarose beads)
| 0.2 ml gravity flow column (5 columns) | 1 ml gravity flow column | 5 ml gravity flow column | 10 ml gravity flow column | 1 ml cartridge | 5 ml cartridge | 4 ml resin | 20 ml resin | 50 ml resin | |
| Sepharose® | N/A | N/A | N/A | N/A | N/A | ||||
| Superflow® high capacity (HC) | N/A | ||||||||
| 4Flow® | |||||||||
| 4Flow® high capacity (HC) | |||||||||
| Application | Gravity flow | FPLC / HPLC | Gravity flow / FPLC / HPLC | ||||||
其他相关产物
| Cat. | Product Name | Size |
| Avidin | 50 mg | |
| BioLock | 50 ml | |
| 250 ml | ||
| Biotin | 2 g | |
| 5 g | ||
| 10x Buffer BXT | 25 ml | |
| 10x Buffer E | 25 ml | |
| 10x Buffer R | 100 ml | |
| 10x Buffer W | 100 ml | |
| Buffer XT-R | 250 ml | |
| Desthiobiotin | 1 g | |
| 5 g | ||
| GFP-Strep-tag control protein | 500 µg | |
| GFP-Twin-Strep-tag® control protein | 500 µg |
